Імунна система настільки якісно і точно працює, що для кожного виду інфекційного захворювання вона використовує свої механізми та реакції. У кожного методу імунної відповіді існують свої специфічні риси. Особливості противірусного імунітету, антибактеріального, протигрибкового складаються із принципів роботи загального та місцевого імунітетів.

Імунітет, імунна відповідь

Імунітет - це несприйнятливість та стійкість до патогенних та генетично чужорідних об'єктів.

Органи імунної системи центральні, що виробляють захисні клітини, і периферичні, що контролюють рідкі середовища організму, шкірні та слизові покриви, а також здійснюють контроль тканинних мігруючих клітин.

В основі діяльності імунітету лежить активний поєднаний вплив необхідних частин системи на впровадження антигену, розпізнавання чужорідного гена та знищення, тобто відповідну відповідь.

Імунна відповідь безпосередньо залежить від типу антигену, швидкості настання імунної реакції, зовнішніх умов.

Імунологічна відповідь буває:

• Вроджений – успадковані механізми;
• Адаптативний – гнучке реагування на появу чужорідного об'єкта.

Віруси

Найпоширенішим збудником інфекційних захворювань є вірусні молекули.

Хвороби людини викликають віруси із суперкаспідами з відростками у вигляді шипів або пепломерів. У даного типуоболонка має додатковий шар, що складається з білкових вірусних частинок та ліпідів заражених клітин.

Вірусний вплив спостерігається у всіх формах життя: від бактерій до людини.

Спосіб зараження

Вірусна молекула починає свій шлях зараження з приєднання до специфічного рецептора, що знаходиться на мембрані здорової клітини. Після прикріплення вірус починає процеси:

• щодо впровадження у зовнішній клітинний простір і злиття з ним;
• По проникненню всередину клітини-мішені.

Далі відбувається руйнація вірусної оболонки, у результаті вивільняється ген. Звільнена генетична інформаціяпровокує синтезування зараженої клітиною вірусних білкових компонентів, відбувається подвоєння та розмноження вірусу, його вихід із загиблої клітини та поширення за іншими відповідними клітинними мембранами.

Противірусна імунна відповідь

Для застосування вірусної молекули в організм головною перешкодою є бар'єрні механізми місцевого та загального імунітету.

Особливості противірусного імунітету полягає в тому, що він діє у двох напрямках:

• Перший напрямок – це вроджені реакції імунітету;
• Друге – набутий антивірус імунітет.

Головною рисою противірусної імунної відповіді є наявність специфічних антитіл, які в першому випадку передаються у спадок, а в другому виробляються у момент виникнення вірусного захворювання.

Вроджена резистентність

Особливості вродженого антивірусу імунітету:

• Цілісні, еластичні, здорові шкірні покриви, з нормальним рН, і неспецифічні покривні способи захисту - не допускають проникнення у внутрішній простір організму. Будь-яка мікроранка – це шлях для вірусу;
• Слизовий секрет і ферменти ротової, носової порожнини, глотки, органів дихання, травлення, мають у наявності фагоцити, макрофаги, антитіла секреторного типу, лімфоцити типу В і Т. Завдяки своїй віроцидній та вірусозв'язувальній дії здатні ліквідувати та видалити вірус з місць організму безпосередньо взаємо довкіллям. Жовч, шлунковий сік протеази функціонують так, щоб руйнувати молекул вірусу до її розмноження;
• Видільна система - в основі її імунологічної функції лежить швидке видалення продуктів життєдіяльності, загиблих або пошкоджених клітин та самих вірусів із внутрішнього середовища. Тому у разі виникнення ГРВІ рекомендується велике споживання рідини;
• Кров і лімфа завдяки наявності вірусозв'язуючих білків, с-реактивного білка, що виробляється печінкою, інтерферонам, фагоцитам, великим гранулярним лімфоцитам, антитілам типу М, G, Д, клітинам Т-кілерам, системі компліменту, знищують віруси та заражені клітини. При хорошому стані імунної системи дані механізми починають свою роботу протягом двох днів після проникнення вірусу та зараження здорових клітин;
• Мембрана клітини - еластична молекулярна клітинна структура, що має специфічні рецептори, до яких може прикріпитися певний вірус, в ній розташовуються лімфоцити типу Т, антитіла і Т-кілери, які захищають здорову клітину від зараження, знижують активність вірусу і знищують його;
• Внутрішнє середовище клітини має спеціальні ферменти, Т-кіллери, антитіла, які активуються під впливом надходження інтерферону.

Можна говорити, що головним механізмом вродженого противірусного імунного опору є інтерферон. Перебуваючи у достатній кількості, стимулює несприйнятливість імунітету на клітинному рівні. Розрізняють інтерферон за видами:

• Альфа – противірусна дія;
• Омега - антипроліферативна, протипухлинна дія;
• Гамма - стимулює клітини імунітету зниження термінів розпізнавання, переробки отриманої інформації, активує клітини: природні кілери, лімфоцити типу В і Т, антегени, підвищує діяльність віроцидної функції, білків, що беруть участь в імунних реакціях.

Ця речовина не сприяють блокуванню вірусних молекулїх функціональна дія спрямована на зміну метаболічних процесів клітин, викликаючи стійкість до вірусу.

Інтерферонові речовини продукуються імунними клітинами під дією вірусних антигенівабо після застосування інтерферон-вмісних препаратів.

Набута резистентність

Особливості противірусного імунітету набутого типу полягають у тому, що резистентність набувається при перенесенні захворювання або шляхом вакцинування, та залежить від наявності специфічних імунних механізмів G, М, антитіл секреторного типу, імунних Т-кілерів.

Перебуваючи в крові навіть у невеликих кількостях специфічні антитіла мають здатність облягати та запобігати розвитку вірусу, блокуючи заражені клітини. За наявності великої кількості антигену відбувається блокада позаклітинного вірусного об'єкта, що у крові. Антитіла сприяє захисту організму від вторинного зараження вірусом певного типу.

В'язні в блокаду віруси знищуються лізисом системи компліменту.

Для нейтралізації вірусного захворювання на противірусний набутий імунітет використовуються вірусспецифічні Т-кілери, що призводять до розвитку нешкідливої ​​інфекції, але для імунної дії такого роду має бути достатня кількість.

Імунна реакція противірусної резистентності

У більшості випадків імунна реакція на проникнення вірусної інфекції складається з:

• Знищення вірусного збудниката заражених клітин;
• Ліквідація вірусних молекул із збереженням заражених клітин;
• Загибель окремих вірус-носіїв з негативним впливом на органи та тканини;
• Відсутність імунної реакції на тривале латентне виживання вірусу в організмі.

Схема захисної реакції:

Проникнення вірусу в організм перешкоджають постійне функціонування та слизових. Якщо з якихось причин місцеві функції імунітету не впоралися зі своєю функцією, вірус проникає в організм і починає заражати здорові клітини. Тут на шляху захворювання встають імунокомпетентні клітини імунітету:

• При первинному зараженні відбувається вироблення антитіл;
• При вторинному зараженні працює антивірус імунітет з антитілами, що залишилися в крові після хвороби.

Специфічні антитіла блокують заражену клітину та білок вірусної оболонки, чим провокують їх знищення лімфоцитами типу Т, що мають цитотоксичну функцію.

Порушення вірусами імунної роботи

Який вірус порушує роботу імунної системи людини – це все віруси, які здатні:

• Ухилятися від імунної дії шляхом мутування;
• мають білкову складову, схожу на білки клітин організму;
• Продукувати властиві риси цитокінів;
• Викликати імуномодуляцію.

Порушення специфічної та неспецифічної резистентності пов'язане з:

• Процес руйнування клітин при розмноженні вірусних молекул. До таких вірусів відносять: ВІЛ, Епштейн-Барр, віспа, герпес, поліомієліт;
• Порушенням сукупності роботи клітин імунітету (ВІЛ, гепатити);
• Стимулюванням дисбалансу між імунними клітинами, що виявляється у розвитку імунодефіциту, алергії (Грип, аденовірус, кір);
• Пригніченням синтезу цитоксинів (цитомегаловірус);
• Розпад бактерицидної властивості нейтрофілів (Грип);
• Розвитком гнітючого ефекту на противірусний імунітет;
• Настанням аутоімунної реакції.

Але невпізнані антитілами віруси можуть без жодних перешкод поширитися певними здоровими клітинами, розвиваючи вірусну хворобу. А внаслідок епідемії та пандемії.

Лікування, захист від вірусних захворювань

Вірусні захворювання, наприклад, супроводжуються вираженими клінічними симптомами: температурою, нежиттю, кашлем, головним болем, загальною слабкістю, а також характерними ознаками: висипаннями, розладом травлення та інші. Для встановлення повноцінного діагнозу проводиться зовнішній огляд, пальпація, зовнішні маніпуляції, беруться відповідні аналізи. І призначається лікування:

• Жарознижувальне;
• Спазмолітики та знеболювальні;
• Засоби від нежиті, кашлю, тобто симптоматична терапія;
• Противірусні засоби;
• Інтерферон, що містять препарати;
• Інші лікарські засоби на розсуд лікаря.

Для захисту від вірусу або для більш легкого перенесення захворювання застосовуються заходи профілактики:

• Гігієна;
• Здоровий спосіб життя;
• Правильне харчування;
• туалет слизових;
• Використання противірусних засобів: оксолінова, інтерферонова мазі;
• Заходи профілактики зниження імунітету;
• Прийом вітамінів;

Наявні методи противірусної вакцинації.

Відео

Відповідь

Репродукція вірусів людини: етапи репродукції, особливості репродукції ДНК-вірусів. Наведіть приклади таких вірусів. Ефект інтерференції між вірусами. Типи взаємодії вірусів із клітиною: продуктивний, абортивний, інтегративний. Типи вірусних інфекцій: літична, персистуюча, латентна, іннапаратна, повільна вірусна інфекція, трансформація клітини.

Діагностичні сироватки, їх підрозділ, отримання та практичне застосування. Моноклональні антитіла. Гібридоми, їх використання для одержання моноклональних антитіл.

Анатоксини: властивості, принцип одержання, одиниці виміру. Асоційовані вакцини, їх властивості, приклади. Охарактеризуйте імунітет, що формується внаслідок введення асоційованих вакцин.

Серологічні реакції, що використовуються в інфекційній імунології (див.20). Реакція імунофлюоресценції. Інгредієнти, механізм прямої та непрямої РИФ.Значение для експрес діагностики інфекційних захворювань.

Імунофлюоресцентний метод (РІФ, реакція імунофлюоресценції, реакція Кунса) – метод виявлення специфічних АГ за допомогою АТ, кон'югованих з флюорохромом. Має високу чутливість і специфічність.

Застосовується для експрес-діагностики інфекційних захворювань (ідентифікація збудника в досліджуваному матеріалі), а також для визначення АТ та поверхневих рецепторів та маркерів лейкоцитів (імунофенотипування) та ін клітин.

Виявлення бактеріальних та вірусних антигенів в інфекційних матеріалах, тканинах тварин та культурах клітин за допомогою флюоресціюючих антитіл (сироваток) набуло широкого застосування в діагностичній практиці. Приготування флюоресціюючих сироваток засноване на здатності деяких флюорохромів (наприклад, ізотіоціанату флюоресцеїну) вступати в хімічний зв'язок із сироватковими білками, не порушуючи їх імунологічної специфічності.

Розрізняють три різновиди методу: прямий, непрямий, з комплементом. Прямий метод РІФзаснований на тому, що антигени тканин або мікроби, оброблені імунними сироватками з антитілами, міченими флюорохромами, здатні світитися в УФ променях люмінесцентного мікроскопа. Бактерії в мазку, оброблені такою люмінесцентною сироваткою, світяться по периферії клітини у вигляді облямівки зеленого кольору.
Непрямий метод РІФполягає у виявленні комплексу антиген - антитіло за допомогою антиглобулінової (проти антитіла) сироватки, міченої флюорохромом. Для цього мазки із суспензії мікробів обробляють антитілами антимікробної кролячої діагностичної сироватки. Потім антитіла, які не зв'язувалися антигенами мікробів, відмивають, а антитіла, що залишилися на мікробах, виявляють, обробляючи мазок антиглобулінової (антикроличої) сироваткою, міченою флюорохромами. В результаті утворюється комплекс мікроб + антимікробні кролячі антитіла + антикролячі антитіла, мічені флюорохромом. Цей комплекс спостерігають у люмінесцентному мікроскопі, як і за прямого методу.

Механізм. На предметному склі готують мазок з досліджуваного матеріалу, фіксують на полум'ї та обробляють імунною кролячою сироваткою, що містить антитіла проти антигенів збудника. Для утворення комплексу антиген - антитіло препарат поміщають у вологу камеру і інкубують при 37 °С протягом 15 хв, після чого ретельно промивають ізотонічним розчином натрію хлориду для видалення антитіл, що не зв'язалися з антигеном. Потім препарат наносять флюоресцирующую антиглобулінову сироватку проти глобулінів кролика, витримують протягом 15 хв при 37 °З, а потім препарат ретельно промивають ізотонічним розчином хлориду натрію. В результаті зв'язування флюоресцентної антиглобулінової сироватки з фіксованими на антигені специфічними антитілами утворюються комплекси, що світяться, антиген - антитіло, які виявляються при люмінесцентній мікроскопії.

25. Серологічні реакції, що застосовуються в інфекційній імунології.

Імуноблот - високочутливий метод виявлення білків, заснований на поєднанні електрофорезу та ІФА або РІА. Імуноблоттинг використовують як діагностичний метод при ВІЛ-інфекції та ін.

Антигени збудника розділяють за допомогою електрофорезу в поліакриламідному гелі, потім переносять їх з гелю на активований папір або нітроцелюлозну мембрану і виявляють за допомогою ІФА. Фірми випускають такі смужки із «блотами» антигенів. На ці смужки наносять сироватку хворого . Потім, після інкубації, відмивають від антитіл хворого, що не зв'язалися, і наносять сироватку проти імуноглобулінів людини, мічену ферментом . Комплекс, що утворився на смужці [антиген + антитіло хворого + антитіло проти Ig людини] виявляють додаванням хромогенного субстрату, що змінює забарвлення під дією ферменту.

За допомогою РІА в біологічних рідинах визначають концентрації гормонів, факторів росту, ферментів, аутоантитіл, маркерів злоякісних новоутворень та інших речовин (наприклад, лікарських засобів та наркотиків).

В основі РІА лежить феномен конкуренції: зв'язування антитіл із антигеном, міченим радіоактивним ізотопом, пригнічується у присутності неміченого антигену.

Методика РІА проста і включає такі основні етапи:

1. До антитіл додають мічений антиген і пробу (що містить невідому кількість неміченого антигену). Концентрацію антитіл у реакційній суміші підбирають так, щоб число місць зв'язування було набагато менше від загальної кількості антигенів. Концентрація міченого антигену має перевищувати максимально можливу концентрацію антигену в пробі.

2. Реакційну суміш інкубують за певної температури заданий час. Мічений та немічений антигени конкурентно зв'язуються з антитілами, при цьому утворюються імунні комплекси, що містять або мічений, або немічений антиген. Таким чином, до кінця інкубації в реакційній суміші присутні мічені та немічені імунні комплекси, а також вільні мічені та немічені антигени. Кількість мічених імунних комплексів обернено пропорційно кількості неміченого антигену в пробі.

3. Щоб оцінити кількість мічених імунних комплексів, що утворилися, їх відокремлюють від вільного міченого антигену, що залишився незв'язаним.

4. Визначають концентрацію антигену в пробі по калібрувальній кривій. Для її побудови використовують кілька стандартних калібрувальних розчинів із відомими концентраціями неміченого антигену.

26. Вакцини: їх підрозділ, основні вимоги до вакцин. Принципи одержання інактивованих вакцин. Наведіть приклади вакцин для планової вакцинації дітей. Охарактеризуйте поствакцинальний імунітет.

ВІДПОВІДЬ:
Вакцини - імунобіологічні препарати, що виготовляються з живих атенуйованих або інактивованих мікроорганізмів, токсинів, мікробних антигенів та використовуються для створення специфічного активного штучного імунітету.
В основному вакцини застосовують з профілактичною метою, значно рідше - з лікувальною (при хронічних затяжних інфекційних захворюваннях)

Підрозділ вакцинних препаратів:
За складом на корпускулярні (живі та інактивовані), розчинні (хімічні та анатоксини) та генно-інженерні; за призначенням на профілактичні та лікувальні.
Розрізняються кілька поколінь вакцин:
-вакцини першого покоління - корпускулярні вакцини, що складаються з цілих мікроорганізмів живих або вбитих.
-вакцини другого покоління; - препарати, що складаються з окремих фракцій збудника або продуктів їх життєдіяльності; -хімічні вакцини та анатоксини.
-вакцини третього покоління -рекомбінатні вакцини, отримані генно-інженерними методами

Основні вимоги до вакцинних препаратів:
-висока імуногенність та створення досить стійкого імунітету
-залишкова вірулентність для атенуйованих штампів та стабільність їх властивостей
-Нешкідливість
-ареактивність (відсутність вироджених побічних реакцій)
-гіпоалергенність (мінімальна сенсибілізуюча дія)
- відсутність у препараті контамінуючих мікроорганізмів
-Доступність вартості виробництва

Інактивовані (убиті) корпускулярні клітини містять мікробні клітини або віріони (корпускулярні бактеріальні та цільновірійні вакцини). Для їх приготування використовують вірулентні мікроорганізми, що містять протективні антигени, активність яких повинна зберігатися після впливу фізичної інактивуючих факторів (нагрівання, ультрафіолетове випромінювання) або хімічної природи (спирт, фенол, ацетон, глутаровий альдегід, формальдегід) або комбінацією обох.
Інактивовані вакцини викликають імунну відповідь гуморального типу, менш напруженого імунітету з меншою тривалістю, ніж живі вакцини, не індукують місцевий імунітет, потрібне їх 2-3х кратне введення, часте проведення повторних курсів імунізації. Вбиті корпускулярні вакцини мають виражену токсичність і алергенність. Їх найважливіша перевага в порівнянні з живими вони ніколи не викликають інфекційних захворювань.

Вакцини для планової вакцинації дітей: АКДС, БЦЖ, АКАДС, ІПВ (інактивована поліомієлітна вакцина).

Після вакцинації розвивається штучний активний імунітет. Виникає після контакту з антигеном. Це передбачає реалізацію всіх етапів імунної реакції з формуванням антиген-специфічних Т-лімфоцитів та антитіл, а також збереженням імунної пам'яті. Перевагами активного імунітету є більш висока ефективність, оскільки напрацьовані імунні фактори найбільше відповідають конкретному антигенному подразнику, а також тривалий, а часом і довічний, ефект післядії, пов'язаний з формуванням клітин пам'яті та підтримкою захисного титру специфічних антитіл у сироватці крові та інших біологічних рідин . До недоліків активного імунітету слід віднести значну енерговитратність та порівняно тривалий термін розвитку. Не передається у спадок.

28. Вакцинація. Ефективність вакцинації. Національний календар щеплень РФ: мета проведення вакцинації дітей та підлітків, характеристика вакцин.

ВІДПОВІДЬ:
Ефективність вакцинації залежить від біологічних властивостейзбудників та виготовлених з них препаратів, способів введення вакцин та імунореактивності макроорганізму.
Вакцинні препарати можуть вводитися в організм людини парентерально (внутрішньом'язово, підшкірно, у скарифіковану шкіру), перорально, інтраназально, а також у свічках та клізмах.
Для вироблення міцного та тривалого імунітету необхідний достатній контакт макроорганізму та антигену, тому у багатьох випадках застосовується повторена вакцинація, терміни чергового введення вакцини залежать від властивостей даного біопрепарату. Потрібен певний період для розвитку гуморального або клітинного імунітету. Не у всіх вакцинованих осіб виникає достатній ступінь несприйнятливості, у деяких людей імунореактивність знижена, може розвиватися імунодефіцитний стан. Ефективність вакцинації залежить від типу та якості застосовуваної вакцини та здатності збудника викликати стійку імунну відповідь. Згідно з національним календарем щеплень РФ всім дітям в обов'язковому порядку проводиться вакцинація проти 10 нозологічних форм - туберкульоз, вірусний гепатитВ, дифтерія, кашлюк, правець, поліомієліт, кір, краснуха, епідемічний паратит, грип. Проти 13 нозологічних форм тільки за епідемічними показаннями - туляремія, чума, бруцельоз, сибірка, сказ, лептоспіроз, кліщовий енцефаліт, лихоманка Ку, жовта лихоманка, черевний тиф, менінгококова інфекція.

ВІДПОВІДЬ:
Анатоксини нерідко відносять до молекулярних вакцин. Одержують з бактеріальних екзотоксинів шляхом 3-5 тижневої дії 0,3-0,4% формаліну при температурі 37-40 С. При спільному впливі цих факторів екзотоксин втрачає свою отруйність, зберігає антигени та імуногенні властивості. Отримані анатоксини піддають очищенню від баластових речовин (живильного середовища, продуктів метаболізму), концентрують та адсорбують на гідроксиді алюмінію, що підвищує імуногенність. У анатоксинів відносно низька реактогенність, тому мало протипоказань до застосування. Очищені адсорбовані анатоксини випускають у рідкому вигляді, застосовують для створення антитоксичного імунітету при таких інфекціях як дифтерія, правець, газова анаеробна інфекція, ботулізм, стафілококова та синьогнійна інфекція та ін., збудники яких виділяють екзотоксини, що грають першорядну роль.

АНТИГЕННА ЄДИНИЦЯ (АЕ), одиниця виміру антигенних та антитоксич. властивостей токсинів та анатоксинів. За Рамоном, характеризується величиною I/Lf, яка відповідає кількості антитоксич. одиниць, що повністю зв'язують 1 мл токсину або анатоксину. По Глені, АЕ вимірюється Lf-limes floculation (порогом флоккуляції), тобто мінім. дозою анатоксину, що повністю зв'язує одну антитоксіч. одиницю антитоксину.

АСОЦІЮВАННІ ВАКЦИНИ (живі + інактивовані) комплексні вакцини є комплексом різних типіввакцини і призначені для одночасної імунізації проти різних інфекцій. Окремі компоненти такої вакцини повинні бути взяті в дозуваннях, що не створюють конкуренції, щоб імунітет формувався до всіх антигенів з однаковою інтенсивністю.
-Полівакцина – містить однорідні антигени (поліомієлітна – типи I, П, III; поліанатоксини).
- комбіновані – складаються з різнорідних антигенів (АКДП-вакцина).

Виникає штучний активний імунітет

30. Діагностичні сироватки: підрозділ, склад, принципи одержання. Аглютинуючі сироватки. Відмінності адсорбованих та неадсорбованих аглютинуючих сироваток. Практичне застосування. приклади.

ВІДПОВІДЬ:
Діагностичні сироватки містять відомі антитіла, їх застосовують у серологічних реакціях для визначення виділеного збудника інфекційного захворювання або його токсину, а також до виявлення невідомих антигенів безпосередньо в досліджуваному матеріалі або з об'єктів навколишнього середовища. Їх отримують шляхом багаторазової імунізації (гіперімунізації) тварин (кролів, баранів) різними антигенами - суспензією мікробів або виділеними з них і очищеними мікробними антигенами, анатоксинами, чужорідними сироватковими білками та іншими корпускулярними та розчиненими антигенами.
Діагностичні сироватки під розділяють залежно від реакції на аглютиніруючі (адсорбовані та неадсорбовані), преципітуючі, гемолітичні та антитоксичні.
Аглютинуюча сироватка - сироватка крові тварин, здатна викликати реакцію аглютинації, що отримується при імунізації тварини певною бактеріальною культурою.
Неадсорбовані та адсорбовані аглютинуючі сироватки.
Неадсорбовані (видові, нативні) сироватки мають високий титр, але недостатньо специфічні. Видові сироватки містять кілька типів антитіл відповідно до набору антигенів того виду бактерій, яким проводилася імунізація тварини. Можуть містити групові антитіла за рахунок яких відбувається аглютинація не тільки з гомологічними бактеріями, але і з родинними бактеріями. Часто групова аглютинація зустрічається у представників роду Salmonella. Для того, щоб уникнути групової аглютинації, застосовують адсорбовані монореципторні сироватки. Вони характеризуються низьким титром, їх застосовують у реакціях аглютинації на склі. Для усунення всіх групових антитіл сироватку послідовно інкубують з різними видамиродинних мікроорганізмів.
Адсорбовані сироватки застосовують при ідентифікації виділених збудників у реакції аглютинації на склі (пластинчастий метод).

Аглютинуючі сироватки найбільш широко застосовуються при діагностиці захворювань, що викликаються бактеріями сімейства Enterobacteriaceae. Так, при ідентифікації ешерихій використовуються полівалентні та типові ОК-сироватки; при диференціації сальмонел - набір сироваток: аглю тинуюча адсорбована полівалентна сальмонельозна О-сироватка (груп А, В, С, Д, Е) - для визначення приналежності до роду Salmonella, при позитивному результаті - визначають окремо з кожною сироваткою (входячи ) серологічну групу і на закінчення визначається серологічний тип виділеного збудника з моно-рецепторними Н-сироватками сальмонел, що входять до цієї групи.

Розділ Вірусологія. Питання 4

Репродукція вірусів у клітині ( продуктивна інфекція) – єдиний процес, який умовно підрозділяють на кілька етапів. Початковий 3 етапи є підготовчими. Власне, репродукція починається з 4 етапу. Процеси репродукції у різних сімейств та пологів вірусів мають суттєві відмінності. Але загалом відбуваються такі закономірності:

1. Адсорбція віріонів на клітиніздійснюється за наявності специфічних рецепторів. У простих вірусів це прикріплювальні білки на поверхні капсиду, а у складних – глікопротеїни, що утворюють шипики на поверхні суперкапсиду. Зі здатністю вірусів прикріплюватися до різних клітинних рецепторів пов'язаний тропізм вірусів.

2. Проникнення віріону в клітину

Шляхом рецепторного ендоцитозу – у місці адсорбції вірусу утворюється ендосома, що містить вірус. Вона поєднується з клітинною лізосомою та вакуоллю, утворюючи рецептосому. (прості та складні віруси)

Злиття мембран суперкапсиду вірусу та клітини. Нуклеокапсид виявляється у цитоплазмі (складні віруси)

Можливе поєднання цих двох процесів.

3. Депротеїнізація («роздягання») вірусівз метою вивільнення нуклеїнової кислоти, яка набуває здатності індукувати репродукцію вірусів.

4. Експресія вірусного геному.Починається з транскрипції (освіта комплементарних та-РНК). Потім йде трансляція(Синтез білка) на клітинних рибосомах. Моноцистронні та-РНК кодують окремий білок, поліцицистронні та-РНК довгий загальний білок, який нарізається клітинними протеазами на окремі білки.

А) У вірусів з двониткової ДНК: геномна ДНК - транскрипція - і-РНК-трансляція - білок. Якщо відбувається в ядрі, то працює клітинна ДНК-залежна РНК-полімераза, якщо в цитоплазмі, то вірусна транскриптаза. Послідовно кодуються ранні і-РНК, потім пізні і-РНК, отже спочатку відбувається трансляція спочатку ранніх неструктурних білків, потім пізніх структурних. Такими є вірусами гепатиту В, вірус герпесу, вірус папіломи.

Б) У плюс-РНК геномна РНК є одночасно інформаційної РНК, тому: Геномна плюс-РНК - трансляція – білок.

В) У мінус-РНК6 Геномна мінус-РНК-транскрипція-і-РНК-трансляція-білок.

Г) у ретровірусів: Геномна РНК-комплементарна ДНК-транскрипція-і-РНК-трансляція-білок.

Потім йде реплікація вірусного геному (синтез множинних копій нуклеїнової кислоти)

А)ДНК-геноми клітинної ДНК-залежної ДНК-полімерази

Б) Плюс-РНК вірусіндукованої РНК-полімерази

В)Мінус-РНК за допомогою РНК-залежної РНК-полімерази.

Г) у ретровірусів клітинної ДНК-залежної РНК-полімерази. Їх необхідна інтеграція ДНК провируса в хромосому клітини, і навіть поєднання інтегративної і продуктивної інфекції.

Диз'юктивний (роз'єднаний) спосіб репродукції-синтез нуклеїнових кислотта білків вірусів у різних частинах клітини та неодночасно.

5. Формування віріонів(У цитоплазмі). Прості вірусишляхом самоскладання, утворюючи нуклеокапсид. Складні віруси спочатку утворюють нуклеокапсид, потім взаємодіють із модифікованою клітинною мембраною, одягаючись суперкапсидом та формуючи М-шар.

6. Вихід віріонів із клітинипри руйнуванні, лізисі або шляхом брунькування (для складних вірусів, які при цьому одягаються суперкапсидом)

Суть механізму РНК-інтерференції полягає в тому, що при введенні в клітини короткої двониткової РНК, вона здатна викликати специфічне руйнування тієї мРНК, з якою має гомологію. Дволанцюгова РНК при цьому розпадається на коротке фрагменти, що позначаються як малі РНК, що інтерферують. Це використовується придушення поширення інфекцій.

Інфекційність вірусів здатна реалізуватися у сприйнятливих клітинах, які мають пермісивність. Тільки пермісивні клітини здатні забезпечити всі етапи репродукції( продуктивна інфекція). Існують непермісивні та напівпермісивні клітинні системи, здатні сприйняти вірус, але не володіють усіма факторами, що забезпечують їх репродукцію. У цьому випадку виникає абортивная інфекція без утворення вірусного потомства.

Вірусна інфекція лише на рівні клітини буває автономної чи інтегративної. Автономна-продуктивна інфекція, при якій вірусний і клітинний гноми, перебуваючи в одній клітині, взаємодіють один з одним, але при цьому залишаються відокремленими. На противагу цьому, при інтегративноїінфекції вірусний геном поєднується з клітинним геномом, стаючи його частиною (для ДНК-вірусів). Це може призвести до порушення синтезу білка в клітині, до неконтрольованого поділу клітин- трансформаціїта розвитку пухлини.

Інаппарантна форма інфекції- гостра безсимптомна інфекція, що протікає за повної відсутності клінічних та біохімічних ознак. Виявляється лише закономірне динамікою маркерів гострої вірусної інфекції.

Для збереження вірусу як біологічного виду дуже важливою є здатність багатьох вірусів персистуватив клітинах організму, тобто зберігатися в організмі тривалий час, іноді довічно, періодично виділяючись в навколишнє середовище. Активуючись віруси можуть викликати ендогенну інфекцію (при недостатності імунітету). в результаті може розвинутися хронічна інфекція.

Вірусна інфекція може бути цитолітичною (клітина гине, лізується після 1-го циклу репродукції) та нецитолітичною (клітина продовжує функціонувати якийсь час і здійснювати репродукції вірусів у декілька циклів, утворюючи симпласти; внутрішньоклітинні включення; можлива латентна інфекція, коли є лише функціональні порушення, які видиме прояв відсутня; можлива трансформаціяклітин та пухлинне зростання.

Для повільних вірусних інфекційхарактерні особливості: тривалий інкубаційний період (від кількох місяців до десятиліть; повільний розвиток захворювання (без ремісій); переважне ураження ЦНС; неминучий смертельний результат. Групи повільних інфекцій:

1. Викликані за певних умов звичайними, «канонічними» вірусами після перенесених вірусних інфекцій (кір, краснуха, кліщовий енцефаліт)

2. Пріонні вірусні інфекції. Пріони - інфекційні вірусні білки, які є видозміненими клітинними білками, що утворилися внаслідок мутацій в гені, що кодує ці білки.

Розділ Вірусологія Питання 5

Мікробіологія: конспект лекцій Ткаченка Ксенія Вікторівна

4. Особливості противірусного імунітету

Противірусний імунітет починається зі стадії презентації вірусного антигену Т-хелперами.

Сильними антигенпрезентируючими властивостями при вірусних інфекціймають дендритні клітини, а при простому герпесіта ретровірусних інфекціях – клітини Лангерганса.

Імунітет спрямований на нейтралізацію та видалення з організму вірусу, його антигенів та заражених вірусом клітин. Антитіла, що утворюються при вірусних інфекціях, діють безпосередньо на вірус або клітини, інфіковані ним. У цьому виділяють дві основні форми участі антитіл у розвитку противірусного імунітету:

1) нейтралізацію вірусу антитілами; це перешкоджає рецепції вірусу клітиною та проникненню його всередину. Опсонізація вірусу за допомогою антитіл сприяє його фагоцитозу;

2) імунний лізис інфікованих вірусом клітин за участю антитіл. При дії антитіл на антигени, експресовані на поверхні інфікованої клітини, до цього комплексу приєднується комплемент із подальшою його активацією, що і зумовлює індукцію комплементзалежної цитотоксичності та загибель інфікованої вірусом клітини.

Недостатня концентрація антитіл може посилювати репродукцію вірусу. Іноді антитіла можуть захищати вірус від дії протеолітичних ферментів клітини, що при збереженні життєздатності вірусу призводить до посилення його реплікації.

Віруснейтралізуючі антитіла діють безпосередньо на вірус лише в тому випадку, коли він, зруйнувавши одну клітину, поширюється на іншу.

Коли віруси переходять з клітини в клітину цитоплазматичним місткам, не контактуючи з циркулюючими антитілами, то основну роль у становленні імунітету відіграють клітинні механізми, пов'язані насамперед з дією специфічних цитотоксичних Т-лімфоцитів, Т-ефекторів і макрофагів. Цитотоксичні Т-лімфоцити безпосередньо контактують з клітиною-мішенню, підвищуючи її проникність та викликаючи осмотичне набухання, розрив мембрани та вихід вмісту в навколишнє середовище.

Механізм цитотоксичного ефекту пов'язаний з активацією мембранних ферментних систем у зоні прилипання клітин, утворенням цитоплазматичних містків між клітинами та дією лімфотоксину. Специфічні Т-кілери з'являються вже через 1-3 дні після зараження організму вірусом, їхня активність досягає максимуму через тиждень, а потім повільно знижується.

Одним із факторів противірусного імунітету є інтерферон. Він утворюється в місцях розмноження вірусу та викликає специфічне гальмування транскрипції вірусного геному та пригнічення трансляції вірусної мРНК, що перешкоджає накопиченню вірусу в клітині-мішені.

Стійкість противірусного імунітету варіабельна. При ряді інфекцій (вітряної віспи, паротиті, кору, краснусі) імунітет досить стійкий, а повторні захворювання трапляються вкрай рідко. Менш стійкий імунітет розвивається при інфекціях дихальних шляхів (грипі) та кишечника.

Тічка. Особливості. Поведінка. Самки домашнього собаки зазвичай регулярно «течуть» двічі на рік, тоді як самки деяких диких собачих та примітивні породи собак часто мають течки лише один раз на рік. Час настання статевої зрілості по-різному для різних порід, але у